Sintesi in fase solida Fmoc/t-Bu

Il metodo Fmoc è un nuovo metodo per  sintesi in fase solida di peptidi  sviluppato da Carpino e Hart sulla base del metodo Boc.

La differenza fondamentale tra la strategia Fmoc/t-Bu(9-fluorenilmetossicarbonil/terz-butossi) e la strategia Boc/Bzl è l'uso di Fmoc rimovibile con alcali come gruppo protettivo per il gruppo α-ammino, la catena laterale è protetta da t-Bu che può essere rimosso mediante TFA e viene utilizzata la resina Wang come vettore in fase solida con braccio di collegamento sensibile agli acidi, e il passaggio finale della sintesi viene rimosso mediante TFA. Han Xiang et al. sintetizzato con successo il peptide 32 timosina α 1 mediante il metodo in fase solida Fm oc, partendo da Fm oc-Asn(Trt)-W angResin, Boc che protegge il gruppo amminico della catena laterale di Lys e il gruppo terz-butile estere (Ot-Bu) che protegge il gruppo carbossilico della catena laterale di Asp e Glu, t-Bu protegge il gruppo idrossilico della catena laterale di Ser e Thr e il gruppo tritile (Trt) protegge il gruppo ammidico della catena laterale di Asn, e la resa di sintesi totale è del 33,2% e la purezza è >98,8%.

L'amminoacido protetto da Fmoc è sensibile alle basi, in particolare alle ammine secondarie, e può essere rimosso con piperidina a temperatura ambiente. In queste condizioni, i gruppi protettivi a base di Z, Boc o altri gruppi amminici non vengono influenzati.

Il gruppo protettivo Fmoc è stabile agli acidi e può essere rimosso in condizioni leggermente alcaline. Può essere utilizzato ortogonalmente ai gruppi protettivi della catena laterale sensibili agli acidi e presenta i vantaggi di condizioni di reazione blande, meno reazioni collaterali e resa elevata. 

La purificazione del prodotto è inoltre facilitata quando l'analogo poliarilico del gruppo protettivo Fmoc è legato all'estremità N-terminale del polipeptide e della proteina. Allo stesso tempo, il gruppo Fmoc presenta un caratteristico assorbimento ultravioletto ed è facile da monitorare e controllare la reazione, il che lo rende sempre più popolare. 

Inoltre, con lo sviluppo dell'industria della sintesi peptidica, il costo dell'Fmoc per proteggere le materie prime degli amminoacidi è notevolmente ridotto e il metodo Fmoc ha gradualmente sostituito il metodo Boc ed è ampiamente utilizzato nella sintesi in fase solida.