Nuove resine Oligo dT per la purificazione e l'isolamento dell'mRNA: esplorazione di una nuova tecnologia basata su sfere magnetiche seminate e resine stirene/DVB a getto

Il nuovo Sunresin Seplife ®La resina di affinità Oligo dT è progettata per la purificazione e l'isolamento dell'mRNA dai processi di produzione di trascrizione in vitro (IVT). Grazie all'esperienza ventennale di Sunresin nella produzione di resine speciali, abbiamo progettato una tecnologia unica che produce una resina polimerica da 50 micron con granulometrie molto uniformi mediante rigonfiamento del seme. La resina è una resina di polistirene divinilbenzene reticolato funzionalizzata con oligo dT20. La resina cattura efficacemente l'mRNA dai componenti del processo di reazione di trascrizione, come enzimi e DNA plasmidico.

Seplife ® Oligo dT è stato progettato per soddisfare la crescente domanda di selettività, capacità e purificazione a valle su larga scala di una gamma di costrutti di mRNA utilizzati nei vaccini, come il vaccino mRNA COVID-19, i vaccini oncologici, i vaccini contro l'AIDS, il trattamento e la prevenzione di malattie rare e altre malattie importanti. Questa resina consente di catturare selettivamente l'mRNA attraverso la coda poliadenilata (polyA) utilizzando semplici fasi di purificazione a base di sale (0,5 M NaCl) e acqua.

Le caratteristiche principali di Oligo dT combinano la facile purificazione dell'mRNA dalla miscela di trascrizione grezza per rimuovere efficacemente il DNA plasmidico e altri componenti IVT, un flusso di lavoro semplificato grazie alla facile adattabilità a diversi tipi di colonne e un'eccellente scalabilità. Naturalmente, la resina è stata progettata per mostrare un'eccellente stabilità a temperature fino a 65 °C e agli alcali per un'efficiente pulizia in loco (CIP).

L'esclusiva tecnologia della resina sviluppata da Sunresin consente di produrre lotti di resina da 50 kg, riducendo così il rischio di variabilità e garantendo le migliori capacità produttive della categoria, utilizzando condizioni GMP e rigorosi controlli di qualità.

La superficie delle microsfere di resina viene modificata, utilizzando una tecnologia proprietaria, per renderla più idrofila e ridurre l'adsorbimento aspecifico. Questo risultato si ottiene aggiungendo un ligando costituito da un braccio distanziatore a catena lunga, riducendo così l'ingombro sterico, aumentando la velocità di trasferimento di massa e garantendo un legame altamente dinamico. La superficie delle microsfere viene quindi funzionalizzata con poli(dT) per consentire la cattura dell'mRNA tramite appaiamento delle basi con la coda poliA dell'mRNA.

In questo poster presentiamo applicazioni nella purificazione di mRNA da 1200 nt utilizzando Oligo dT, utilizzando la tecnica di cattura e rilascio in condizioni standard di purificazione dell'mRNA. Inoltre, il rivestimento applicato sulla resina consente la riduzione del DNA plasmidico e di altri componenti della miscela di trascrizione.

Presentiamo inoltre le resine magnetiche di nuova concezione funzionalizzate con oligo dT per una facile purificazione e separazione nelle fasi di ricerca e sviluppo. Queste sfere magnetiche partono da un nucleo di resina di polistirene divinilbenzene, realizzato con un'esclusiva tecnologia di seeding che permette di ottenere sfere monodimensionali da 1 a 3 micron. Queste sfere vengono poi rivestite con Fe3O4 e poi completamente rivestite con un guscio in poliuretano che le protegge completamente dal rilascio del materiale paramagnetico.

Queste particelle magnetiche consentono una separazione facile e veloce dell'mRNA, migliorando così il processo di sviluppo e screening di nuove terapie geniche.