CM Seplife ®Resina per cromatografia di agarosio FF

Resina per cromatografia su agarosio  

CM seplife FF

CM Seplife ® Profilo del prodotto della resina per cromatografia di agarosio FF:

CM Seplife ® Il mezzo per cromatografia FF è un nuovo tipo di mezzo per cromatografia di agarosio altamente reticolato sviluppato indipendentemente da Sunresin. È un catione debole formato legando gruppi carbossimetilici al mezzo cromatografico di filtrazione su gel di agarosio.  Mezzi per cromatografia a scambio ionico . Ha un'elevata portata, una bassa contropressione, un elevato carico dinamico, una buona stabilità chimica e proprietà meccaniche, un basso adsorbimento non specifico, un alto tasso di recupero, facile da ampliare, può ridurre i tempi di produzione e migliorare l'efficienza produttiva. Ampiamente usato in  purificazione mediante cromatografia a scambio ionico  delle proteine ​​a valle,  acidi nucleici  E  peptidi  In  biofarmaceutica e bioingegneria .

CM Seplife ® Parametri della resina per cromatografia di agarosio FF:

CM Seplife ® Istruzioni per il test sulla resina cromatografica di agarosio FF:

1.Imballaggio della colonna
Operazione di imballaggio in conformità con le procedure operative standard. È necessario assicurarsi che ciascun materiale sia alla temperatura di lavoro e che il gel debba essere degassato prima del confezionamento.
2.Equilibrio
Equilibrare la colonna con da 2 a 5 volte il volume del letto della soluzione di bilanciamento del carico. Assicurarsi che la conduttività e il pH dell'effluente siano esattamente uguali alla conduttività e al pH del tampone di caricamento. La soluzione di equilibrio è una soluzione tampone a bassa concentrazione, come Tris, PBS, ecc.
3.caricamento
(1)Il campione viene preparato con la soluzione bilanciata e il campione torbido deve essere centrifugato e filtrato prima del caricamento. I campioni con una concentrazione eccessiva di sale vengono preparati dopo l'elaborazione.
(2)In genere, il prodotto target viene legato alla colonna, le impurità vengono lavate via con la soluzione di equilibrazione, quindi l'eluente viene selezionato per lavare il prodotto target.
(3)Il grado in cui il mezzo assorbe i componenti del campione dipende dalle proprietà di carica del campione, dalla forza ionica della fase mobile e dal valore del pH. La concentrazione di sale è piccola e il mezzo assorbe più saldamente i componenti del campione. Quando si utilizzano mezzi per cromatografia CM, il valore di pH consigliato è 1 unità maggiore del punto isoelettrico del prodotto target.
4.Eluizione
Aumentare la concentrazione di sale o aumentare il valore del pH per l'eluizione, comunemente usato per aumentare la concentrazione di sale.
5.Rigenerazione
Generalmente, lavare prima con un tampone ad alta concentrazione salina (contenente 1~2mol/L NaCl) o ridurre il pH di oltre 10 volte il volume della colonna, quindi lavare fino all'equilibrio con la soluzione di equilibrazione quando si legano le proteine.
Se sono presenti proteine ​​o lipidi inattivati ​​che non possono essere lavati via durante la rigenerazione, possono essere rimossi con CIP.
6.Pulizia in atto
(1)La proteina legata tramite legame ionico può essere rimossa di 0,5~1 volte il volume del letto di NaCl 2M.
(2)Per le proteine ​​precipitate, le proteine ​​o i lipidi legati idrofobicamente, è possibile prima sciacquare con un volume di letto 1M di NaOH 0,1M, quindi lavare con una soluzione tampone di equilibrazione fino a quando il pH è neutro.
(3)Per proteine ​​e lipidi con forte legame idrofobico, lavare con 4-10 volte il volume del letto di etanolo al 70% o alcol isopropilico al 30%. Va notato che la concentrazione del solvente organico aumenta gradualmente in modo graduale, altrimenti è facile che si formino bolle.
7. Conservazione
Sigillato e conservato a 4~30°C (la soluzione di conservazione è composta al 20% di etanolo) in un luogo asciutto, ventilato e pulito e non può essere congelato; le colonne usate vengono conservate a 4~8°C, in una soluzione di etanolo al 20%.
8.Trasporti
Evitare la luce solare, la pioggia e la forte pressione durante il trasporto ed è severamente vietato trasportare con materiali tossici e nocivi.

CM Seplife ® Resina per cromatografia su agarosio FF Questioni che richiedono attenzione:

(1)Selezione della colonna: in teoria, finché la colonna è sufficientemente lunga, è possibile ottenere la risoluzione ideale, ma poiché la portata della colonna è correlata al gradiente di pressione, l'aumento della lunghezza della colonna rende la portata più lenta, il picco si allarga e la risoluzione diminuisce; il diametro della colonna aumenta, quindi aumenta l'irregolarità del flusso del liquido e la risoluzione diminuisce in modo significativo. UN
(2)Il pH e la forza ionica del tampone di eluizione devono essere rigorosamente controllati durante il processo di purificazione. Il campione e il mezzo per cromatografia CM devono essere accuratamente equilibrati con il tampone di eluizione prima della cromatografia su colonna. UN
(3) Il letto della colonna installato deve essere piatto e privo di canali e bolle, altrimenti deve essere reinstallato.
(4) La portata deve essere rigorosamente controllata durante l'eluizione e non troppo veloce.
(5)Il volume del campione dovrebbe essere piccolo e la concentrazione non dovrebbe essere troppo alta.
(6) Evitare che il cilindro si secchi durante l'aggiunta del campione e l'intero processo di eluizione.