SP Seplife ®Resina per cromatografia di agarosio FF

Resina per cromatografia su agarosio  

SP seplife FF

SP Seplife ® Profilo del prodotto della resina per cromatografia di agarosio FF:

SP vita ® FF  resina per cromatografia  è un nuovo altamente reticolato  resina per cromatografia di agarosio  sviluppato in modo indipendente da Sunresin. È un tipo di propile a base di acido solfonico legato  Resina cromatografica per filtrazione su gel di agarosio . Resina per cromatografia a scambio cationico forte con portata elevata, bassa contropressione, elevato carico dinamico, buona stabilità chimica e proprietà meccaniche, basso adsorbimento non specifico, alto tasso di recupero, conveniente scalabilità, riduzione dei tempi di produzione e miglioramento della produttività. È ampiamente usato in  Separazione delle proteine ​​mediante scambio ionico ,  acidi nucleici  E  peptidi  a valle di  biofarmaceutica e bioingegneria .

SP Seplife ® Parametri della resina per cromatografia di agarosio FF:

SP Seplife ® Resina per cromatografia di agarosio FF Istruzioni per il test:

1.Imballaggio della colonna
L'imballaggio viene eseguito secondo le procedure operative standard. È necessario garantire che ciascun materiale sia alla temperatura operativa e che il gel debba essere degassato prima di essere confezionato.
2.Equilibrio
Equilibrare la colonna con 2-5 volumi di colonna della bilancia di carico, assicurandosi che la conduttività e il pH dell'effluente siano esattamente uguali alla conduttività e al pH del tampone di caricamento.
La soluzione di equilibrio è una soluzione tampone a bassa concentrazione come NaOAC, PBS e simili. Una soluzione di equilibrio comunemente usata è tampone acetato 0,1 mol/L, pH 5,0.
3.Caricamento del campione
(1)Il campione viene preparato con una soluzione bilanciata e il campione torbido viene centrifugato e filtrato per il caricamento. I campioni con una concentrazione eccessiva di sale vengono elaborati e quindi dispensati.
(2) In generale, il prodotto target viene combinato su una colonna, le impurità vengono lavate via con una soluzione all'equilibrio e viene selezionato un eluente per lavare il prodotto target.
(3)La misura in cui il mezzo assorbe i componenti del campione dipende dalla natura carica del campione, dalla forza ionica della fase mobile e dal pH. La concentrazione di sale è piccola e il mezzo viene assorbito più saldamente dai componenti del campione. Quando si utilizzano mezzi per cromatografia SP, il pH consigliato è 1 unità sopra il punto isoelettrico del prodotto target.
4.Eluizione
L'eluizione può essere effettuata aumentando la concentrazione di sale o aumentando il pH e generalmente aumentando la concentrazione di sale. Un eluente comunemente usato (soluzione B) come: tampone acetato 0,1 mol/L + 2 mol/L NaCl, pH 5,0.
5.Rigenerazione
Generalmente, il tampone viene lavato con un'elevata concentrazione di sale (contenente 1~2mol/L NaCl) oppure il pH viene ridotto di 10 volte o più, quindi lavato con una soluzione equilibrata della proteina legata per bilanciare.
Se le proteine ​​o i lipidi inattivati ​​non vengono lavati via durante la rigenerazione, possono essere rimossi mediante pulizia sul posto (CIP).
6.CIP
(1)Le proteine ​​legate tramite legame ionico possono essere rimosse con un volume compreso tra 0,5 e 1 del letto della colonna di NaCl 2 M.
(2) Per le proteine ​​precipitate, le proteine ​​o i lipidi legati idrofobicamente, è possibile lavarli prima con il volume del letto di 1 colonna di NaOH 0,1 M e poi con una soluzione tampone di equilibrio fino a quando il pH è neutro.
(3) Per proteine, lipidi, ecc. fortemente legati idrofobicamente, lavare con un volume da 4 a 10 volte superiore al volume del letto di etanolo al 70% o isopropanolo al 30%. Si noti che la concentrazione del solvente organico aumenta gradualmente in modo graduale, altrimenti è facile creare bolle.
7. Conservazione
Sigillato e conservato a 4~30°C (la soluzione di conservazione è composta da etanolo al 20% + 0,2mol/L di acetato di sodio), luogo asciutto, ventilato e pulito, non può essere congelato;
La colonna usata viene conservata a 4~8°C, soluzione di etanolo al 20% + 0,2mol/L di acetato di sodio.

SP Seplife ® Resina per cromatografia di agarosio FF Attenzione:

(1)Selezione della colonna: in teoria, finché la colonna è sufficientemente lunga, è possibile ottenere la risoluzione ideale, ma poiché la portata della colonna è correlata al gradiente di pressione, la lunghezza della colonna aumenta per rallentare la portata, il picco diventa più ampio e la risoluzione Diminuisce; il diametro della colonna aumenta, provocando un aumento della disuniformità del flusso del liquido ed una notevole diminuzione della risoluzione.
(2)Il pH e la forza ionica del tampone di eluizione devono essere rigorosamente controllati durante il processo di purificazione. La cromatografia su colonna deve essere eseguita dopo che il campione e il mezzo per cromatografia SP devono essere completamente equilibrati con il tampone di eluizione.
(3) Il letto della colonna deve essere piatto, senza scanalature e bolle d'aria, altrimenti deve essere reimballato.
(4) La portata deve essere controllata rigorosamente durante il processo di eluizione e non troppo veloce.
(5)Il volume del campione dovrebbe essere piccolo e la concentrazione non dovrebbe essere troppo alta.
(6)Durante il caricamento e l'intero processo di eluizione, viene impedita l'essiccazione della superficie del cilindro.