Resina cromatografia di agarosio a flusso rapido
Seplife 6ff
Seplife®6FF Fast Agarose Chromatography Resina Profilo prodotto:
Seplife® 6ff resina cromatografia di agarosio a flusso rapido è formato dalla reticolazione su seplife® 6b Media cromatografia di agarosio. La sua stabilità chimica e le proprietà fisiche sono significativamente migliorate con portate elevate, carico elevato e adsorbimento a basso specifico. Ha un alto tasso di recupero e può essere riutilizzato molte volte. Può essere usato per cromatografia di filtrazione in gel E Purificazione delle proteine, acidi nucleici E peptidi a valle di Biofarmaci e bioingegneria.
Seplife®6FF Fast Flow Agarose Cromatography Parametri in resina:
| Codice in resina | Seplife® 6ff |
| Aspetto | Perle di sfera bianca |
| Dimensione delle particelle (μm) | 45 ～ 165 |
| Matrice | 6% di agarosio reticolato |
| Portata (cm/h) | <300 |
| Pressione (MPA) | 0.2 |
| stabilità del pH | 2 ~ 12 (lungo termine), 2 ~ 14 (breve termine, CIP) |
| Applicazione | Proteine, acidi nucleici e peptidi a valle di
Biofarmaci e bioingegneria |
| Stabilità chimica | Soluzione stabile in tampone d'acqua: 2m Naoh; 70% di etanolo, 30%
Isopropanolo, 30% acetonitrile, 1% SDS, 6M guanidina
cloridrato, 8m urea. |
| Limite di esclusione | 10000 ~ 4 × 106 globulina |
Condizioni del test: Colonna di cromatografia 16mm * 300mm; Colonna altezza del letto 15 cm; temperatura 25 ℃;
La fase mobile era di NaCl 0,1 mol / L. |
Seplife®6FF Fast Flow Agarose Cromatography Resina Istruzione di prova:
1.Column Packing
L'imballaggio viene eseguito in conformità con le procedure operative standard. È necessario garantire che ogni materiale sia a temperatura operativa e che il gel debba essere deggato prima che sia imballato.
2. Equilibrio
Equilibrare la colonna con volumi da 2 a 5 colonne dell'equilibrio di carico, assicurandosi che la conducibilità e il pH dell'effluente siano esattamente gli stessi della conducibilità e del pH del tampone di carico.
3. Caricamento del campione
(1) Il campione viene preparato con un tampone e il campione torbido viene centrifugato e filtrato per il carico. I campioni con un contenuto di sale eccessivo e una concentrazione troppo piccola devono essere trattati prima e quindi caricati.
(2) La separazione dei componenti del campione da parte del mezzo viene eseguita in base al peso molecolare dei componenti e il peso molecolare viene prima sfuggito.
(3) Il volume di caricamento è di circa l'1-2% del volume della colonna e più piccolo è meglio prestazioni di separazione.
4. Eluizione
L'eluizione è stata effettuata con tampone e la portata e la composizione del tampone sono state mantenute costanti durante l'eluizione.
5. Regenerazione
Di solito viene lavato con un tampone per l'equilibrio e può essere riutilizzato. Alcune proteine inattivate o lipidi non possono essere lavate durante la rigenerazione e possono essere rimosse mediante la pulizia sul posto (CIP).
6.Cip
(1) Per una proteina legata a ioni, può essere rimosso con volume letto da 0,5 a 1 colonna di NaCl 2 M.
(2) Per proteine precipitate, proteine o lipidi legati idrofobici, può essere rimosso con volume letto a 1 colonna di NaOH 0,1 M. (3) Per proteine, lipidi, ecc., Possono essere lavati con volumi da 4 a 10 colonne di etanolo al 70% o isopropanolo al 30%. Tuttavia, va notato che la concentrazione del solvente organico viene gradualmente aumentata in modo gradiente, altrimenti le bolle vengono facilmente generate.
Dopo il completamento della pulizia, equilibra la colonna con almeno 3 volumi di letti di tampone di equilibrio fino a quando il pH e la conduttanza rimangono invariati.
7.Storage
Sigillato e conservato a 4 ~ 30 ℃ (20% di etanolo in soluzione di stoccaggio), asciutto, ventilato, pulito, non congelato; Le colonne usate sono memorizzate in una soluzione di etanolo 4 ℃, 20%.
Seplife®6FF Fast Flow Agarose Cromatography Resina Attenzione:
(1) Il volume del campione deve essere concentrato il più possibile prima di utilizzare la filtrazione del gel.
(2) Il campione deve essere chiarito senza particelle.
(3) Per ottenere la massima risoluzione, il volume di carico non può superare il 5% del volume del letto.
(4) La cromatografia a colonna deve essere eseguita dopo il campione e il terreno cromatografico deve essere completamente equilibrata con il tampone di eluizione.
(5) Il letto della colonna deve essere piatto, privo di scanalature e bolle d'aria, altrimenti dovrebbe essere rimontata.
(6) Al fine di proteggere la stabilità e l'attività della proteina, viene selezionata una proteina di purificazione tampone.
(7) Al fine di evitare l'interazione ionica non specifica tra proteina e mezzo, è possibile aggiungere fino a 0,15 moli/L NACL al tampone.
(8) Secondo il peso molecolare della proteina bersaglio, viene selezionato il mezzo più vicino all'intervallo di separazione mediana.
(9) La portata dovrebbe essere strettamente controllata durante il processo di eluizione e non troppo veloce.
(10) Durante il caricamento e l'intero processo di eluizione, la superficie del cilindro viene impedito di asciugare.
(11) Questo prodotto dovrebbe evitare il contatto con agenti ossidanti ed evitare un'esposizione prolungata all'aria.
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Sunresin Park, No.135, jinye Road, Xi'an Hi-tech Industrial Development Zone, Shaanxi-710076, Cina 
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