Sintesi in fase solida Fmoc / t-Bu

Il metodo Fmoc è un nuovo metodo per  sintesi in fase solida di peptidi  sviluppato da Carpino e Hart sulla base del metodo Boc.

La differenza fondamentale tra la strategia Fmoc/t-Bu(9-fluorenilmetossicarbonil/tert-butossi) e la strategia Boc/Bzl è l'uso di Fmoc alcalino-rimovibile che è un gruppo protettivo per il gruppo 伪-amminico, la catena laterale è protetta da t-Bu che può essere rimosso mediante TFA, e viene utilizzata la resina Wang portante in fase solida con braccio di collegamento sensibile agli acidi, e la fase finale della sintesi viene rimossa mediante TFA. Han Xiang et al. ha sintetizzato con successo il 32-peptide timosina 伪 1 con il metodo in fase solida Fm oc, partendo da Fm oc-Asn(Trt)-W angResin, Boc che protegge il gruppo amminico della catena laterale di Lys e il gruppo estere tert-butilico (Ot-Bu Protecting il gruppo carbossilico della catena laterale di Asp e Glu, t -Bu protegge il gruppo idrossilico della catena laterale di Ser e Thr, e il gruppo tritile (Trt) protegge il gruppo ammidico della catena laterale di Asn, e la resa di sintesi totale è del 33,2%, e il la purezza è >98,8%.

L'amminoacido protetto Fmoc è sensibile alle basi, in particolare alle ammine secondarie, e può essere rimosso con piperidina a temperatura ambiente. In queste condizioni, i gruppi protettivi a base Z, a base Boc o altri gruppi amminici protettivi non sono influenzati.

Il gruppo protettivo Fmoc è stabile agli acidi e può essere rimosso in condizioni blande alcaline. Può essere utilizzato ortogonalmente ai gruppi protettivi della catena laterale sensibili agli acidi e presenta i vantaggi di condizioni di reazione blande, minori reazioni collaterali e resa elevata. 

La purificazione del prodotto è facilitata anche quando l'analogo poliarilico del gruppo protettivo Fmoc è attaccato all'estremità N-terminale del polipeptide e della proteina. Allo stesso tempo, il gruppo Fmoc ha un caratteristico assorbimento dell'ultravioletto ed è facile da monitorare e controllare la reazione, quindi è sempre più popolare. 

Inoltre, con lo sviluppo dell'industria della sintesi peptidica, il costo dell'Fmoc per proteggere le materie prime degli aminoacidi è notevolmente ridotto e il metodo Fmoc ha gradualmente sostituito il metodo Boc ed è ampiamente utilizzato nella sintesi in fase solida.