Seplife ®6FF Resina per cromatografia di agarosio a flusso veloce

Resina per cromatografia di agarosio a flusso veloce

Seplife 6FF

Seplife ®Resina per cromatografia di agarosio a flusso rapido 6FF Profilo del prodotto:

Seplife ® 6FF  resina per cromatografia di agarosio a flusso rapido  si forma per reticolazione su Seplife ® 6B  mezzi per cromatografia di agarosio . La sua stabilità chimica e le proprietà fisiche sono significativamente migliorate con portate elevate, carico elevato e basso adsorbimento specifico. Ha un alto tasso di recupero e può essere riutilizzato più volte. Può essere utilizzato per  Cromatografia per filtrazione su gel  E  purificazione delle proteine ,  acidi nucleici  E  peptidi  a valle di  biofarmaceutica e bioingegneria .

Seplife ®6FF Cromatografia di agarosio a flusso veloce Parametri della resina:

Seplife ®6FF Cromatografia di agarosio a flusso veloce Resina  Istruzioni per il test:

1.Imballaggio della colonna
L'imballaggio viene eseguito secondo le procedure operative standard. È necessario garantire che ciascun materiale sia alla temperatura operativa e che il gel debba essere degassato prima di essere confezionato.
2.Equilibrio
Equilibrare la colonna con 2-5 volumi di colonna della bilancia di carico, assicurandosi che la conduttività e il pH dell'effluente siano esattamente uguali alla conduttività e al pH del tampone di caricamento.
3.Caricamento del campione
(1)Il campione viene preparato con un tampone e il campione torbido viene centrifugato e filtrato per il caricamento. I campioni con un contenuto di sale eccessivo e una concentrazione troppo bassa devono essere prima trattati e poi caricati.
(2)La separazione dei componenti del campione dal mezzo viene effettuata in base al peso molecolare dei componenti e il peso molecolare viene prima fatto defluire.
(3)Il volume di caricamento è circa l'1-2% del volume della colonna e più piccolo è, migliore è la prestazione di separazione.
4.Eluizione
L'eluizione è stata effettuata con tampone e la portata e la composizione del tampone sono state mantenute costanti durante l'eluizione.
5.Rigenerazione
Di solito viene lavato con un tampone per bilanciare e può essere riutilizzato. Alcune proteine ​​o lipidi inattivati ​​non possono essere eliminati durante la rigenerazione e possono essere rimossi mediante pulizia sul posto (CIP).
6.CIP
(1)Per una proteina legata a ioni, è possibile rimuoverla con un volume del letto di colonna compreso tra 0,5 e 1 di NaCl 2 M.
(2)Per le proteine ​​precipitate, le proteine ​​o i lipidi legati idrofobicamente, è possibile rimuoverli con il volume di 1 letto di colonna di NaOH 0,1 M. (3) Per proteine, lipidi, ecc. fortemente legati idrofobicamente, è possibile lavarlo con volumi da 4 a 10 colonne di etanolo al 70% o isopropanolo al 30%. Va tuttavia notato che la concentrazione del solvente organico viene gradualmente aumentata in modo graduale, altrimenti si formano facilmente bolle.
Una volta completata la pulizia, equilibrare la colonna con almeno 3 volumi di letto di tampone di equilibrazione fino a quando il pH e la conduttanza rimangono invariati.
7. Conservazione
Sigillato e conservato a 4~30°C (etanolo al 20% nella soluzione di conservazione), asciutto, ventilato, pulito, non congelato; le colonne usate vengono conservate in una soluzione di etanolo al 20% da 4°C.

Seplife ®6FF Cromatografia di agarosio a flusso veloce Resina  Attenzione:

(1)Il volume del campione deve essere concentrato il più possibile prima di utilizzare la filtrazione su gel.
(2)Il campione deve essere chiarificato senza particelle.
(3)Per ottenere la massima risoluzione, il volume di caricamento non può superare il 5% del volume del letto.
(4) La cromatografia su colonna deve essere eseguita dopo che il campione e il mezzo cromatografico devono essere completamente equilibrati con il tampone di eluizione.
(5)Il basamento della colonna deve essere piatto, privo di scanalature e bolle d'aria, altrimenti deve essere rimontato.
(6)Per proteggere la stabilità e l'attività della proteina, viene selezionata una proteina di purificazione tampone.
(7)Per evitare interazioni ioniche non specifiche tra proteina e terreno, è possibile aggiungere al tampone fino a 0,15 mol/L di NaCl.
(8)In base al peso molecolare della proteina bersaglio, viene selezionato il terreno più vicino all'intervallo di separazione mediano.
(9) La portata deve essere rigorosamente controllata durante il processo di eluizione e non troppo veloce.
(10)Durante il caricamento e l'intero processo di eluizione, viene impedita l'essiccazione della superficie del cilindro.
(11)Questo prodotto deve evitare il contatto con agenti ossidanti ed evitare l'esposizione prolungata all'aria.