CM Seplife ®Resina cromatografica di agarosio FF

Resina per cromatografia di agarosio  

CM seplife FF

CM Seplife ® Resina cromatografica di agarosio FF Profilo del prodotto:

CM seplife ®Il mezzo cromatografico FF è un nuovo tipo di mezzo cromatografico a base di agarosio altamente reticolato, sviluppato indipendentemente da Sunresin. Si tratta di un catione debole formato legando gruppi carbossimetilici al mezzo cromatografico a base di agarosio per filtrazione su gel.  Supporti per cromatografia a scambio ionico Presenta un'elevata portata, una bassa contropressione, un elevato carico dinamico, una buona stabilità chimica e proprietà meccaniche, un basso assorbimento non specifico, un elevato tasso di recupero, è facile da scalare, può ridurre i tempi di produzione e migliorare l'efficienza produttiva. Ampiamente utilizzato in  purificazione mediante cromatografia a scambio ionico  delle proteine ​​a valle,  acidi nucleici  E  peptidi  In  biofarmaceutici e bioingegneria .

CM Seplife ® Parametri della resina cromatografica di agarosio FF:

CM Seplife ® Istruzioni per il test della resina cromatografica di agarosio FF:

1.Imballaggio a colonna
Operazione di confezionamento in conformità con le procedure operative standard. È necessario assicurarsi che ogni materiale sia alla temperatura di esercizio e che il gel venga degassato prima del confezionamento.
2. Equilibrio
Equilibrare la colonna con una soluzione di bilanciamento del letto da 2 a 5 volte il volume della soluzione di carico. Assicurarsi che la conduttività e il pH dell'effluente siano esattamente gli stessi della conduttività e del pH del tampone di carico. La soluzione di bilanciamento è una soluzione tampone a bassa concentrazione, come Tris, PBS, ecc.
3. caricamento
(1) Il campione viene preparato con la soluzione di bilanciamento e il campione torbido deve essere centrifugato e filtrato prima del caricamento. I campioni con una concentrazione salina eccessiva vengono preparati dopo l'elaborazione.
(2)In genere, il prodotto target viene legato alla colonna, le impurità vengono lavate via con la soluzione di equilibratura e quindi l'eluente viene selezionato per lavare il prodotto target.
(3) Il grado di adsorbimento dei componenti del campione da parte del mezzo dipende dalle proprietà cariche del campione, dalla forza ionica della fase mobile e dal valore del pH. La concentrazione salina è bassa e il mezzo adsorbe i componenti del campione in modo più efficace. Quando si utilizzano mezzi cromatografici per cromatografia liquida (CM), il valore di pH raccomandato è di 1 unità superiore al punto isoelettrico del prodotto target.
4.Eluizione
Aumentare la concentrazione salina o aumentare il valore del pH per l'eluizione, comunemente utilizzato per aumentare la concentrazione salina.
5.Rigenerazione
In genere, lavare prima con un tampone ad alta concentrazione salina (contenente 1~2 mol/L NaCl) o ridurre il pH di oltre 10 volte il volume della colonna, quindi lavare fino all'equilibrio con la soluzione di equilibratura quando si lega la proteina.
Se sono presenti proteine ​​o lipidi inattivati ​​che non possono essere eliminati durante la rigenerazione, è possibile rimuoverli tramite CIP.
6. Pulizia sul posto
(1) Per la proteina legata tramite legame ionico, può essere rimossa da 0,5 a 1 volte il volume del letto di 2 M NaCl.
(2) Per le proteine ​​precipitate, le proteine ​​legate idrofobicamente o i lipidi, è possibile prima risciacquare con un volume di letto di 1 M di NaOH 0,1 M, quindi lavare con una soluzione tampone di equilibrio fino a quando il pH non è neutro.
(3) Per proteine ​​e lipidi con forte legame idrofobico, lavare con una soluzione di etanolo al 70% o alcol isopropilico al 30% in una quantità da 4 a 10 volte il volume del letto. Si noti che la concentrazione del solvente organico aumenta gradualmente in modo graduale, altrimenti è facile che si formino bolle.
7. Conservazione
Sigillate e conservate a 4-30°C (la soluzione di conservazione è al 20% di etanolo) in un luogo asciutto, ventilato e pulito e non possono essere congelate; le colonne usate sono conservate a 4-8°C, con una soluzione di etanolo al 20%.
8.Trasporti
Evitare la luce solare, la pioggia e le forti pressioni durante il trasporto; è severamente vietato trasportare materiali tossici e nocivi.

CM Seplife ® Resina per cromatografia di agarosio FF Problemi che richiedono attenzione:

(1) Selezione della colonna: in teoria, finché la colonna è sufficientemente lunga, è possibile ottenere la risoluzione ideale, ma poiché la portata della colonna è correlata al gradiente di pressione, l'aumento della lunghezza della colonna rallenta la portata, il picco si allarga e la risoluzione diminuisce; il diametro della colonna aumenta, quindi aumenta l'irregolarità del flusso del liquido e la risoluzione diminuisce in modo significativo. A
(2) Il pH e la forza ionica del tampone di eluizione devono essere rigorosamente controllati durante il processo di purificazione. Il campione e il mezzo cromatografico CM devono essere accuratamente equilibrati con il tampone di eluizione prima della cromatografia su colonna.
(3) Il letto della colonna installato deve essere piatto e privo di canali e bolle, altrimenti deve essere reinstallato.
(4) La portata deve essere rigorosamente controllata durante l'eluizione e non troppo veloce.
(5)Il volume del campione deve essere piccolo e la concentrazione non deve essere troppo elevata.
(6)Impedire che il cilindro si asciughi durante l'aggiunta del campione e l'intero processo di eluizione.