SP Seplife ®Resina cromatografica di agarosio FF

Resina per cromatografia di agarosio  

SP seplife FF

SP Seplife ® Resina cromatografica di agarosio FF Profilo del prodotto:

SP seplife ® FF  resina cromatografica  è un nuovo altamente reticolato  resina per cromatografia di agarosio  sviluppato indipendentemente da Sunresin. Si tratta di un tipo di propile a base di acido solfonico legato su  resina per cromatografia su gel di agarosio Resina cromatografica a scambio cationico forte con elevata portata, bassa contropressione, elevato carico dinamico, buona stabilità chimica e proprietà meccaniche, basso assorbimento non specifico, elevato tasso di recupero, facile scalabilità, riduzione dei tempi di produzione e miglioramento della produttività. Ampiamente utilizzata in  separazione delle proteine ​​mediante scambio ionico ,  acidi nucleici  E  peptidi  a valle di  biofarmaceutici e bioingegneria .

SP Seplife ® Parametri della resina cromatografica di agarosio FF:

SP Seplife ® Resina per cromatografia di agarosio FF Istruzioni per il test:

1.Imballaggio a colonna
Il confezionamento viene eseguito secondo le procedure operative standard. È necessario assicurarsi che ogni materiale sia alla temperatura di esercizio e che il gel venga degassato prima del confezionamento.
2. Equilibrio
Equilibrare la colonna con 2-5 volumi di colonna della bilancia di carico, assicurandosi che la conduttività e il pH dell'effluente siano esattamente gli stessi della conduttività e del pH del tampone di carico.
La soluzione di bilanciamento è una soluzione tampone a bassa concentrazione come NaOAC, PBS e simili. Una soluzione di bilanciamento comunemente utilizzata è il tampone acetato 0,1 mol/L, a pH 5,0.
3. Caricamento del campione
(1) Il campione viene preparato con una soluzione di bilanciamento e il campione torbido viene centrifugato e filtrato per il caricamento. I campioni con una concentrazione salina eccessiva vengono processati e quindi dispensati.
(2)In generale, il prodotto target viene combinato su una colonna, le impurità vengono lavate via con una soluzione di equilibrio e viene selezionato un eluente per lavare il prodotto target.
(3) La misura in cui il mezzo adsorbe i componenti del campione dipende dalla natura carica del campione, dalla forza ionica della fase mobile e dal pH. La concentrazione salina è bassa e il mezzo adsorbe i componenti del campione in modo più deciso. Quando si utilizzano mezzi cromatografici SP, il pH raccomandato è 1 unità superiore al punto isoelettrico del prodotto target.
4.Eluizione
L'eluizione può essere effettuata aumentando la concentrazione salina o aumentando il pH, e generalmente aumentando la concentrazione salina. Un eluente comunemente utilizzato (soluzione B) è: tampone acetato 0,1 mol/L + NaCl 2 mol/L, pH 5,0.
5.Rigenerazione
In genere, il tampone viene lavato con un'elevata concentrazione di sale (contenente 1~2 mol/L di NaCl) oppure il pH viene ridotto di 10 volte o più, quindi lavato con una soluzione di equilibrio della proteina legata per bilanciare.
Se le proteine ​​o i lipidi inattivati ​​non vengono lavati via durante la rigenerazione, possono essere rimossi mediante pulizia in loco (CIP).
6.CIP
(1)Per le proteine ​​legate tramite legame ionico, è possibile rimuoverle con un volume del letto di colonna da 0,5 a 1 di 2 M NaCl.
(2) Per le proteine ​​precipitate, le proteine ​​legate idrofobicamente o i lipidi, è possibile lavarli prima con un volume di letto di colonna di 0,1 M NaOH, e poi con una soluzione tampone di equilibrio fino a quando il pH è neutro.
(3) Per proteine, lipidi, ecc. fortemente legati idrofobicamente, lavare con una soluzione di etanolo al 70% o isopropanolo al 30% in una quantità da 4 a 10 volte il volume del letto. Si noti che la concentrazione del solvente organico aumenta gradualmente in modo graduale, altrimenti è facile che si formino bolle.
7. Conservazione
Sigillato e conservato a 4~30°C (la soluzione di conservazione è composta dal 20% di etanolo + 0,2 mol/L di acetato di sodio), in un luogo asciutto, ventilato e pulito, non può essere congelato;
La colonna usata viene conservata a 4~8°C, soluzione di etanolo al 20% + 0,2 mol/L di acetato di sodio.

SP Seplife ® Resina per cromatografia di agarosio FF Attenzione:

(1) Selezione della colonna: in teoria, finché la colonna è sufficientemente lunga, è possibile ottenere la risoluzione ideale, ma poiché la portata della colonna è correlata al gradiente di pressione, la lunghezza della colonna aumenta per rallentare la portata, il picco diventa più ampio e la risoluzione diminuisce; il diametro della colonna aumenta, causando un aumento della non uniformità del flusso del liquido e una significativa diminuzione della risoluzione.
(2) Il pH e la forza ionica del tampone di eluizione devono essere rigorosamente controllati durante il processo di purificazione. La cromatografia su colonna deve essere eseguita dopo che il campione e il mezzo cromatografico SP devono essere completamente equilibrati con il tampone di eluizione.
(3) Il letto della colonna deve essere piano, senza scanalature e bolle d'aria, altrimenti deve essere riempito nuovamente.
(4) La portata deve essere rigorosamente controllata durante il processo di eluizione e non deve essere troppo veloce.
(5)Il volume del campione deve essere piccolo e la concentrazione non deve essere troppo elevata.
(6)Durante il caricamento e l'intero processo di eluizione, si impedisce che la superficie del cilindro si asciughi.