Seplife ®Resina per cromatografia di agarosio a flusso rapido 6FF

Resina per cromatografia su agarosio a flusso rapido

Seplife 6FF

Seplife ®6FF Resina per cromatografia su agarosio a flusso rapido Profilo del prodotto:

Seplife ® 6FF  resina per cromatografia di agarosio a flusso rapido  si forma per reticolazione su Seplife ® 6B  terreni di coltura per cromatografia su agarosio La sua stabilità chimica e le sue proprietà fisiche sono significativamente migliorate grazie ad elevate portate, elevato carico e basso adsorbimento specifico. Presenta un elevato tasso di recupero e può essere riutilizzato più volte. Può essere utilizzato per  cromatografia a filtrazione su gel  E  purificazione delle proteine ,  acidi nucleici  E  peptidi  a valle di  biofarmaceutici e bioingegneria .

Seplife ®6FF Cromatografia agarosio a flusso rapido Parametri della resina:

Seplife ®6FF Cromatografia agarosio a flusso rapido Resina  Istruzioni per il test:

1.Imballaggio a colonna
Il confezionamento viene eseguito secondo le procedure operative standard. È necessario assicurarsi che ogni materiale sia alla temperatura di esercizio e che il gel venga degassato prima del confezionamento.
2. Equilibrio
Equilibrare la colonna con 2-5 volumi di colonna della bilancia di carico, assicurandosi che la conduttività e il pH dell'effluente siano esattamente gli stessi della conduttività e del pH del tampone di carico.
3. Caricamento del campione
(1) Il campione viene preparato con un tampone e il campione torbido viene centrifugato e filtrato per il caricamento. I campioni con un contenuto salino eccessivo e una concentrazione troppo bassa devono essere trattati prima e poi caricati.
(2)La separazione dei componenti del campione mediante il mezzo viene effettuata in base al peso molecolare dei componenti, e il peso molecolare viene prima fatto defluire.
(3) Il volume di carico è pari a circa l'1-2% del volume della colonna e più è piccolo, migliori sono le prestazioni di separazione.
4.Eluizione
L'eluizione è stata effettuata con tampone e la portata e la composizione del tampone sono state mantenute costanti durante l'eluizione.
5.Rigenerazione
Di solito viene lavato con un tampone per bilanciarlo e può essere riutilizzato. Alcune proteine ​​o lipidi inattivati ​​non possono essere lavati via durante la rigenerazione e possono essere rimossi con la pulizia in loco (CIP).
6.CIP
(1)Per una proteina legata da ioni, può essere rimossa con un volume del letto di colonna da 0,5 a 1 di 2 M NaCl.
(2) Per proteine ​​precipitate, proteine ​​legate idrofobicamente o lipidi, può essere rimosso con 1 volume di letto di colonna di NaOH 0,1 M. (3) Per proteine, lipidi, ecc. legati fortemente idrofobicamente, può essere lavato con 4-10 volumi di colonna di etanolo al 70% o isopropanolo al 30%. Tuttavia, è opportuno notare che la concentrazione del solvente organico viene aumentata gradualmente in modo gradiente, altrimenti si generano facilmente bolle.
Una volta completata la pulizia, equilibrare la colonna con almeno 3 volumi di tampone di equilibratura fino a quando il pH e la conduttanza rimangono invariati.
7. Conservazione
Sigillato e conservato a 4-30°C (20% di etanolo in soluzione di conservazione), asciutto, ventilato, pulito, non congelato; le colonne usate sono conservate in una soluzione di 4°C e 20% di etanolo.

Seplife ®6FF Cromatografia agarosio a flusso rapido Resina  Attenzione:

(1) Il volume del campione deve essere concentrato il più possibile prima di utilizzare la filtrazione su gel.
(2)Il campione deve essere chiarificato senza particelle.
(3)Per ottenere la massima risoluzione, il volume di carico non può superare il 5% del volume del letto.
(4) La cromatografia su colonna deve essere eseguita dopo il campione e il mezzo cromatografico deve essere completamente equilibrato con il tampone di eluizione.
(5) Il letto della colonna deve essere piano, privo di scanalature e bolle d'aria, altrimenti deve essere rimontato.
(6)Per proteggere la stabilità e l'attività della proteina, viene selezionata una proteina di purificazione tampone.
(7)Per evitare interazioni ioniche non specifiche tra proteina e mezzo, è possibile aggiungere al tampone fino a 0,15 mol/L di NaCl.
(8)In base al peso molecolare della proteina target, viene selezionato il mezzo più vicino all'intervallo di separazione mediano.
(9) La portata deve essere rigorosamente controllata durante il processo di eluizione e non deve essere troppo veloce.
(10)Durante il caricamento e l'intero processo di eluizione, si impedisce che la superficie del cilindro si asciughi.
(11)Questo prodotto deve evitare il contatto con agenti ossidanti ed evitare l'esposizione prolungata all'aria.